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ctab法提取dna的原理 CTAB提取缓冲液的改进配方是什么? CTAB提取缓冲液中添加PVP的作用是什么? 如何去除DNA中的多糖?

CTAB法提取DNA的原理 CTAB法提取DNA的主要原理包括:

  1. CTAB的作用:CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子去污剂,可以溶解细胞膜并形成与核酸的复合物。在高盐浓度下,CTAB与蛋白质和多糖形成复合物,但不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,可以去除蛋白、多糖、酚类等杂质,最后加入乙醇沉淀DNA


  2. 其他成分的作用
  1. 络合作用:PVP可以与多酚和萜类物质形成不溶的络合物,有效去除这些次生代谢物质,从而减少对DNA提取的干扰。
  2. 抗氧化作用:PVP可以抑制酚类物质的氧化,防止DNA发生褐变。
  3. 去除多糖:PVP能有效去除多糖,因为多糖和PVP之间存在较强的亲和力,可以形成不溶的复合物,从而被去除


    如何去除DNA中的多糖 去除DNA中的多糖可以通过以下方法:
  4. 使用高浓度的盐:在氯仿-异戊醇(24∶1)抽提后的水相中加入高浓度的盐(如5 mol/L NaCl),可以去除多糖,因为多糖在高盐条件下会沉淀,而DNA则保持溶解状态
  5. 使用PVP:在提取缓冲液中加入PVP,PVP可以与多糖形成不溶的复合物,从而被去除

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